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辣椒醬中羅丹明B的測定

更新時間:2017-10-16 點(diǎn)擊次數(shù):2828
 1、適用范圍

 

適用于辣椒醬中羅丹明B的檢測。

2、檢測原理

采用非極性有機(jī)溶劑(正己烷+丙酮)將羅丹明B從辣椒醬中溶解并提取,提取液過中性氧化鋁SPE小柱吸附羅丹明B,然后用非極性有機(jī)溶劑(正己烷+丙酮)洗脫樣品油脂和內(nèi)源性干擾物,再用極性有機(jī)溶劑(甲醇-水)將羅丹明B從小柱上洗脫,供儀器分析

3、提取步驟

取辣椒醬1g,置入15ml離心管中,加入10ml 20%丙酮-正己烷溶液,超聲提取 10 min,離心后取上清液。重復(fù)提取兩次,合并三次提取的上清液,待SPE凈化。

4、SPE柱凈化過程

SPE柱:月旭Welchrom®羅丹明B專用固相萃取柱,3g/6mL

1)活化:10ml 20% 丙酮-正己烷溶液;

2)上樣:將提取好的樣品溶液加入小柱中,流速不宜過快;

3)淋洗:30ml 20%丙酮-正己烷淋洗至過柱流出液體為無色,棄去流出液,抽干小柱,

4)洗脫:10ml 80%甲醇-水溶液,收集洗脫液,用80%甲醇-水溶液定容至10mL,上機(jī)測定。

注意:

1)進(jìn)行加標(biāo)回收率實驗時,往1g辣椒醬中加入40mg/mL 的標(biāo)液0.125mL;

2)配置25ml 40mg/ml羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液,用20%丙酮正己烷無法溶解,需加入2ml甲醇助溶解。

3)將上清液加入月旭Welchrom®羅丹明B專用固相萃取柱中,含羅丹明B的樣品提取液在柱上部會出現(xiàn)鮮亮的粉紅色的熒光條帶,且粉紅條帶隨含量的增加而加深和加寬,不含羅丹明B的樣品提取液不會出現(xiàn)粉紅色條帶,只會出現(xiàn)黃紅色的不清晰的寬帶;

4)用含20%丙酮-正己烷淋洗小柱,粉紅色的條帶不下移,但更清晰,其余的黃紅色帶下移可大部分被洗脫出,可判斷為含羅丹明B的可疑樣品;

5)待洗柱的流出液無色時,使用10ml 80%甲醇-水溶液洗脫,將羅丹明B色帶洗下并收集。

6)羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)液相時用80%甲醇-水溶液稀釋上機(jī);

7)過柱速率不能太快,否則回收率不理想;

5、色譜條件

色譜柱:月旭Ultimate XB-C18, 4.6×150 mm, 5µm;

流動相:75%甲醇-水溶液;

流速: 1.0mL/min

柱溫: 30℃

檢測波長:550nm

進(jìn)樣量: 20µL

6、色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果

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