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高效液相色譜柱的再生過程是怎樣的?

更新時間:2020-11-03 點擊次數:1483
   高效液相色譜柱采用內壁經過精密加工拋光的不銹鋼管,以獲得高柱效。不銹鋼管耐溶劑、水和緩沖溶液的腐蝕,使用前色譜柱管先用甲醇和水依次清洗,再用50%的hno3對柱內壁作鈍化處理。鈍化時使hno3在色譜柱管中至少滯留10min,以在柱內壁形成鈍化的氧化物涂層。也采用氟塑料、玻璃和玻璃襯里材料,主要是從抗腐蝕和易加工方面考慮。
 
  高效液相色譜柱的再生:
  因為色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數的增加,當出現(xiàn)色譜峰峰高變低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰時,一般來說可能是柱效下降。
  (1)、反相柱的再生,采用以甲醇:水=90:10(V/V),純甲醇,異丙醇,二氯甲烷等溶劑作流動相,順次沖洗,每種流動相流經色譜柱的量為20~30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。
 
  (2)、正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作流動相沖洗色譜柱。每步注意平衡溶劑的順序,不要顛倒。每種流動相流經色譜柱的量為20-30倍柱體積(因異丙醇的粘度較大,沖洗過程中請注意調整沖洗的流速),用甲醇沖洗完后,再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意上述溶劑必需嚴格脫水。另外,請清洗前嚴格熟讀色譜柱說明書,了解哪些溶劑不可用。
 
  (3)、離子交換柱的再生。長時間在高pH值和高離子強度緩沖溶液中使用,將導致色譜柱離子交換能力降低。用稀酸緩沖溶液沖洗,可使陽離子柱再生;反之,用稀堿緩沖溶液沖洗,可使陰離子柱再生。
 
  以上色譜柱的再生方法并不是的標準方法,使用者可根據自己的實際經驗和目的,選擇合適的并能溶解柱內污染物的溶劑作流動相,按正方向或反方向的沖洗。

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