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液相維護(hù)小貼士:紫外檢測(cè)器篇

更新時(shí)間:2021-11-18 點(diǎn)擊次數(shù):5228

小伙伴們大家好,之前我們討論了泵和進(jìn)樣器的維護(hù)之后,今天我們來聊聊檢測(cè)器。

有人說Chemistry代表Chem is try很有意思?;瘜W(xué)的美妙在于它的無限可能性。中學(xué)化學(xué)老師曾經(jīng)說過“結(jié)構(gòu)決定性質(zhì),性質(zhì)決定用途。"擴(kuò)展到我們的分析工作中,也決定了分析手段,所有的分析都有規(guī)律可循,緣分“結(jié)構(gòu)"注定!

在色譜實(shí)驗(yàn)室中紫外檢測(cè)器是bi備的,70%以上的物質(zhì)都可以用紫外檢測(cè)器來分析,今天我們就扒一扒紫外可見檢測(cè)器。


一、紫外檢測(cè)器的原理

紫外-可見光檢測(cè)器(UV-Vis Detector, UVD)是應(yīng)用*泛的檢測(cè)器,遵循的原理是朗勃比爾定律。

吸光度(A)=摩爾吸光度(ε)×光程(b)×濃度(c)。

吸光度定義為透射率的負(fù)對(duì)數(shù),它是透射光與入射光的強(qiáng)度之比。

吸光度(A)= lg(1/透射率(T))。

紫外檢測(cè)器的靈敏度與溶劑的影響、背景吸收、示差折光效應(yīng)有關(guān),不同種類溶劑有其截止波長(zhǎng),溶劑的質(zhì)量好壞對(duì)其截止波長(zhǎng)有影響,溶劑質(zhì)量與含紫外吸收的雜質(zhì)、溶解在其中的氧氣、緩沖液溶質(zhì)的紫外吸收等因素有關(guān);背景吸收減少線性范圍、許多溶劑會(huì)產(chǎn)生背景吸收。


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紫外可見檢測(cè)器還有個(gè)Plus的兄弟——二極管陣列檢測(cè)器。

光電二極管矩陣檢測(cè)器簡(jiǎn)稱PDA(Photo-Diode Array),有的品牌也稱為DAD(Diode Array Detector),一般來說,紫外檢測(cè)器比DAD的靈敏度高約1倍。但DAD也有它的優(yōu)勢(shì),一是可以對(duì)未知物進(jìn)行波長(zhǎng)掃描確定最佳吸收波長(zhǎng),二是可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)波長(zhǎng),三是可以進(jìn)行峰純度的檢査。 


紫外檢測(cè)器與DAD的區(qū)別為:紫外檢測(cè)器是光源發(fā)出的光先分光,讓特定波長(zhǎng)的光通過狹縫,這樣光的強(qiáng)度可以調(diào)節(jié),然后通過流通池,光束被流通池里的樣品吸收,未吸收的光達(dá)到光電二極管,產(chǎn)生電流變化,DAD光源發(fā)出的光不分光,讓全波段波長(zhǎng)的光通過狹縫,然后通過流通池,光束被流通池里的樣品吸收,未吸收光被分光,各種波長(zhǎng)的光落在不同位置的二極管上,各二極管產(chǎn)生電流變化。因?yàn)槭呛蠓止?,所以DAD不同波長(zhǎng)處光強(qiáng)度并不一致,波長(zhǎng)分辨率也不及單波長(zhǎng)的紫外檢測(cè)器,需要通過其他手段來提高某些波長(zhǎng)的靈敏度

二、紫外檢測(cè)器的優(yōu)缺點(diǎn)


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三、紫外檢測(cè)器的維護(hù)


紫外檢測(cè)器出問題,通常是氘燈、流通池、光路問題,我們可自行解決的是換氘燈、清洗流通池。

以月旭科技Wisys5000 HPLC為例更換氘燈:

注意:

1、在開始下面描述的程序之前,拔下電源插頭斷開本單元的電源。只有在將上蓋安裝回其位置之后,該單元才可以重新連接到電源。

2、 紫外線對(duì)眼睛有害!斷開設(shè)備電源!用螺絲刀 Torx T10 擰下燈罩蓋。


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切勿用裸手觸摸石英燈泡,因?yàn)樵诤髞泶蜷_燈時(shí)指紋會(huì)不可避免地?fù)p壞燈。燈的位置在設(shè)備中精確確定,不需要進(jìn)一步調(diào)整。燈更換后的組裝步驟與拆卸相同,只是按相反的順序。打開本機(jī)并點(diǎn)亮燈,如果沒有發(fā)生錯(cuò)誤,請(qǐng)關(guān)閉燈,然后進(jìn)行新燈泡的校準(zhǔn)。

更換鎢燈的步驟近似,感興趣的小伙伴可以單聊。


以Wisys5000為例清洗流通池窗片/更換流通池窗片

污染的流通池會(huì)降低光的傳輸,增加噪聲,很難使信號(hào)歸零。zui簡(jiǎn)單的清洗方法是用合適的溶劑沖洗拆除的流通池。清洗前必須從儀器取出流通池。根據(jù)污染物的特性選擇互溶性系列的溶劑。它可以使用有機(jī)和無機(jī)溶劑和稀釋酸溶液(如用1:10 到 1:20的稀硫酸或硝酸溶液)。此操作完成后用純?nèi)軇_洗流通池。連接流通池到系統(tǒng),當(dāng)有液體流過時(shí),觀察是否泄漏。


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如果有必要更換有裂紋或受污染的窗片,或改變制備流通池的光學(xué)路徑,擰下螺釘,拆下流通池蓋并取出窗片和密封件。使用干燥的注射器往里推空氣可以更好的移除密封的流通池窗片,不要用手觸摸窗片。指紋會(huì)阻擋紫外線輻射的通道,并有可能損壞的窗片表面。將干凈的窗片插入到流通池中,以便在流通池中調(diào)整所需的光路。檢查墊片的完好情況 和密封件的密封面是否有窗片碎片或任何其他雜質(zhì)。損壞的密封件須更換。

今天的話題就扒到這里了,下期見。


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