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穩(wěn)定的pH環(huán)境在HPLC檢測中的重要性

更新時間:2022-09-15 點(diǎn)擊次數(shù):994

在液相色譜中,經(jīng)常會在流動相中加入緩沖溶液,其目的之一就是使整個HPLC系充處理一個穩(wěn)定的化學(xué)環(huán)境,從而使檢測具有更好的重現(xiàn)性。若系統(tǒng)的pH不夠穩(wěn)定,則會出現(xiàn)保留時間漂移,多次檢測保留時間不能重現(xiàn),多組分出峰順序,峰組成不一致等等的各種問題。

特別是酸堿性成分的檢測,pH值對其保留與峰型都有很大的影響,因此,這些成分檢測時,HPLC系統(tǒng)的pH穩(wěn)定性就非常的重要,需在流動相中加入相應(yīng)的緩沖鹽來保持系統(tǒng)的穩(wěn)定性。例如我們平常使用的鹽例如磷酸在1.5-3.5的pH范圍內(nèi),有比較好的緩沖能力。

實例:

某成分原流動相僅使用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值,但并未加緩沖鹽體系,因HPLC系統(tǒng)的pH值不夠穩(wěn)定,而導(dǎo)致的樣品檢測時某一個峰產(chǎn)生漂移,多次實驗,結(jié)果不能重現(xiàn)的問題。


圖1:流動相中沒有緩沖溶液,系統(tǒng)pH值不穩(wěn)定

微信截圖_20220915132401.png

在這個實例中,原流動相沒有緩沖能力,pH值不穩(wěn)定,將流動相替換成鹽后,能提供穩(wěn)定的緩沖能力,使各個物質(zhì)到達(dá)較滿意的分離,并具有比較好的重現(xiàn)性。

圖2:在流動相中加入緩沖鹽,使系統(tǒng)pH保持穩(wěn)定

微信截圖_20220915132407.png



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